Анти-M (Anti-MNS1)
(моноклональный, мышь)
ЦЕЛЕВОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ
Моноклональное агглютинирование Анти-M - реагентов производится из культуры клеток супернатантов гетерогибридомы-клеточных линий. Клетки, секретирующие антитела, вступающие в специфическую реакцию с соответствующим антигеном. Реагенты используются для определения, обладают ли эритроциты соответствующими антигенами групп крови. Реагенты предназначены для использования только квалифицированным и техническим персоналом.
ПРИНЦИП ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ ДЕЙСТВИЙ
Процедуры, с использованием этих реагентов основаны на принципе агглютинации. Нормальные эритроциты человека, обладающие соответствующим антигеном будут агглютинировать в присутствии специфического антитела, направленного к антигену.
РЕАГЕНТЫ
Указанный реагент содержит антитела следующего клона:
Анти-М (моноклональное, мышь, клоны LM-110/140)
Реагент содержит <0,1% (вес / объем) азида натрия в качестве консерванта. Дополнительно реагент получают из активных антител, хлорида натрия, макромолекул и бычьего альбумина.
ВНИМАНИЕ
Данный реагент получен из супернатантов клеточных культур. Тем не менее, в роли биопрепарата его следует рассматривать как потенциально инфекционный из-за существования опасности через возбудителей заболевания. Реагент содержит азид натрия, который может быть токсичным и может вступать в реакцию со свинцом или медью для образования взрывоопасных солей. При утилизации, промойте большим количеством воды. В силу этих причин с реагентом необходимо обращаться очень аккуратно.
ТРЕБОВАНИЯ ПО ХРАНЕНИЮ
Продукты в открытом и закрытом состоянии следует хранить при температуре от + 2 до + 8°C. Тогда как при использовании (от + 15 до + 30°С). Необходимо хранить и использовать реагенты только до указанного срока годности.
ПРИМЕЧАНИЯ
- Дозировка положительных реакций также зависит от возраста, используемой крови.
- При каждом положительном и отрицательном тестировании, должна быть выполнена проверка.
- Неправильное хранение ухудшает эффективность реагента.
- Центрифугирование сильно отличается от определенной относительной центробежной силы, что может привести к неправильным результатам.
- Образцы крови для испытания должны быть использованы как можно скорее. Если возникает задержка в тестировании, то образцы должны храниться при температуре от 2 до 8 ° C. Кровь втягивается в цитрат натрия или ЭДТА и должна быть проверена в течение 14 дней.
- Процедура, определенная ниже предназначена только для ручного тестирования. При использовании автоматических или полуавтоматических инструментов, следуйте указаниям, которые содержатся в руководстве по эксплуатации, предоставляемом с устройством от производителя. Лаборатории должны следовать утвержденным процедурам проверки, чтобы продемонстрировать совместимость этого продукта на автоматизированных системах.
- В целях использования этих реагентов, все действующие национальные законы, директивы и нормы, должны соблюдаться, особенно в Германии „Richtlinien zur Gewinnung von Blut und Blutbestandteilen und zur Anwendung von Blutprodukten (Hämotherapie)“.
ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТА
Подготовка реагентов не требуется. Используйте реагенты непосредственно из флаконов.
ПОРЯДОК ДЕЙСТВИЯ
Не требуется дополнительного материала
Метод центрифугирования пробирки
- Пробирки, 10 x 75 мм или 12 x 75 мм
- Пипетки предназначены для подачи около 100 мкл
- Центрифуга
- Изотонический раствор; (с 0,85 - 0,9% хлорида натрия)
Порядок испытания
Метод центрифугирования пробирки
- Используйте суспензию только от 2 до 5% эритроцитов в изотоническом растворе (клетки промываются от одного до трех раз изотоническим солевым раствором).
- Добавить 100 мкл (альтернативный подход: одна капля = приблизительно 50 мкл) реагента в каждую пробирку.
- Добавить 100 мкл (альтернативный подход: одна капля = примерно 50 мкл) соответствующей взвеси отмытых клеток в каждую пробирку.
- Тщательно перемешать, слегка встряхивая.
- Выдержать пробирку при комнатной температуре (от +15 до +30 °C) в течение 15 мин.
- Центрифугирование пробирки должно проходить в течение 1 мин при 1000 оборотов в минуту (приблизительно 180-270 г).
- Аккуратно ресуспендируйте эритроциты и проверьте макроскопически для склеивания в течение 3 минут. Запишите результат.
ТРАКТОВКА АНАЛИЗА
"Слегка покачивая" методом центрифугирования трубки
Положительные результаты (+): видимые агглютинации эритроцитов означают положительный результат и свидетельствуют
о наличии соответствующего антигена.
Отрицательные результаты (-): отсутствие видимого склеивания эритроцитов представляет отрицательный результат и показывает
отсутствие соответствующего антигена.
ОГРАНИЧЕНИЯ ПОРЯДКА ДЕЙСТВИЙ
- Неточности при соответствии инструкциям, которые написаны в соответствии с разделом «Последовательность действий» и «Толкование результатов» могут приводить к неправильным результатам.
- Не получится достичь обоснованного вывода в отношении результата теста, если будет проходить профилактика с неопределенными или ложными результатами.
- Фермент, при проведении лечения эритроцитами может реагировать в не специфической форме.
- Добавление бычьего альбумина или белка, содержащего растворы может привести к не специфическим реакциям.
- Благодаря изменчивости экспрессии антигенов, реакционная способность этих реагентов против определенных фенотипов может дать более слабую реактивность по сравнению с контрольными клетками.
- Эритроциты, покрытые аллоантителами или аутоантителами такой же или подобной специфичности в качестве реагента (т.е. клетки, которые являются положительными в прямом антиглобулиновом тесте (ПАТ)) могут показать слабые реакции. В редких случаях могут произойти ложноотрицательные результаты.