Анти-K (Anti-KEL1)
Кумбс-реактив (поликлональный, человеческий)
Для непрямой пробы Кумбса
ВВЕДЕНИЕ
Поликлональный Кумбс-реактив Анти-К - реагент получают из плазмы крови человека, который содержит конкретное антитело иммуноглобулин класса G, вступающий в реакцию исключительно с соответствующим антигеном. Реагент используются для определения, обладают ли эритроциты человека соответствующей группой крови антигена К. Реагент может быть использован только квалифицированным техническим персоналом.
ПРИНЦИП ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ ДЕЙСТВИЙ
Процедуры с использованием этого реагента основаны на принципе агглютинации. Нормальные человеческие эритроциты, обладающие соответствующим антигеном будут признаны и покрыты соответствующим специфическим антителом, затем клетки будут агглютинированы вторичным антителом, которое вступает в реакцию с человеческими молекулами иммуноглобулина класса G.
РЕАГЕНТЫ
Указанный реагент доступен по следующей формулировке:
Анти-K Кумбс-реакционно-способный (поликлональный, человеческий)
Реагент содержит <0,1% (вес / объем) азида натрия в качестве консерванта. Кроме частей активных антител и сыворотки человека, реагент содержит хлорид натрия, макромолекулы и бычий альбумин.
ВНИМАНИЕ
Данный реагент был подготовлен из плазмы крови человека. Вещество для данного продукта протестировано для поверхностного антигена вируса гепатита В, ВИЧ и РНК вируса гепатита С антител и установлено как отрицательное. Тем не менее, в роли биопрепарата его следует рассматривать как потенциально инфекционный из-за существования опасности через возбудителей заболевания. Реагент содержит азид натрия, который может быть токсичным и может вступать в реакцию со свинцом или медью для образования взрывоопасных солей. При утилизации, промойте большим количеством воды. С реагентом необходимо обращаться с должной осторожностью по причинам упомянутым выше.
ТРЕБОВАНИЯ ПО ХРАНЕНИЮ
Продукты в открытом и закрытом состоянии следует хранить при температуре от + 2 до + 8°C. Тогда как при использовании (от + 15 до +30 °C). Храните и используйте реагент только до указанной даты истечения срока.
ПРИМЕЧАНИЯ
- Сила положительных реакций также зависит от возраста, используемой крови.
- С каждым положительным и отрицательным тестированием, должна быть выполнена проверка.
- Слабое помутнение реагента не влияет на его реакционную способность.
- Неправильное хранение ухудшает эффективность реагента.
- Центрифугирование сильно отличается от назначенной относительной центробежной силы, что приведет к неправильным результатам.
- Образцы крови для испытания должны быть использованы как можно скорее. Если возникает задержка в тестировании, то образцы должны храниться при температуре от 2 до 8°C. Кровь втягивается в цитрат натрия или ЭДТА и должна быть проверена в течение 14 дней.
- Процедура, определенная ниже предназначена только для ручного тестирования. При использовании автоматизированных инструментов, следуйте указаниям, которые содержатся в руководстве по эксплуатации, предоставляемое с устройством от производителя. Лаборатории должны следовать утвержденным процедурам проверки, чтобы продемонстрировать совместимость этого продукта на автоматизированных системах.
- В целях использования этого реагента, все действующие национальные законы, директивы и норы, должны соблюдаться, особенно в Германии „Richtlinien zur Gewinnung von Blut und Blutbestandteilen und zur Anwendung von Blutprodukten (Hämotherapie)“.
ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТА
Подготовки реагента не требуется. Используйте реагент непосредственно из флакона.
ПОРЯДОК ДЕЙСТВИЯ
Дополнительно требуется
Метод центрифугирования пробирки
- Пробирки, 10 x 75 мм или 12 x 75 мм
- Пипетки предназначены для подачи около 100 мкл, 50 мкл
- центрифуга
- Изотонический раствор; (0,85 - 0,9% хлорида натрия)
- анти-человеческий-глобулин-сыворотки (Кумбс-сыворотка)
Порядок испытания
Метод центрифугирования пробирки
- Используйте суспензию только от 2 до 5% эритроцитов в изотоническом растворе (клетки промываются от одного до трех раз изотоническим солевым раствором).
- Добавить 100 мкл (альтернативный подход: одна капля = приблизительно 50 мкл) соответствующей клеточной суспензии в каждую пробирку.
- Добавить 100 мкл (альтернативный подход: одна капля = примерно 50 мкл) соответствующей взвеси отмытых клеток в каждую пробирку.
- Тщательно перемешать, слегка встряхивая.
- Инкубируйте трубку при 37°С в течение 30 мин.
- Вымойте эритроциты 3 раза с (холодным) изотоническим солевым раствором.
- Добавьте 100 мкл анти-человеческой-глобулин-сыворотки (Кумбс-сыворотка) в каждую пробирку
- Центрифугирование трубки в течение 1 мин при 1,000 оборотов в минуту (приблизительно 180-270 мкг).
- Аккуратно ресуспендируйте эритроциты и проверьте макроскопически для склеивания в течение 3 минут. Запишите результат.
ТРАКТОВКА АНАЛИЗА
"Слегка покачивая" методом центрифугирования трубки
Положительные результаты (+): видимые агглютинации эритроцитов означают положительный результат и свидетельствуют о наличии соответствующего антигена. Отрицательные результаты (-): Нет видимых агглютинации эритроцитов, это является отрицательным результатом и свидетельствует об отсутствии соответствующего антигена.
ОГРАНИЧЕНИЯ ПОРЯДКА ДЕЙСТВИЙ
Погрешность в соответствии инструкциям, написанным в соответствии с разделом "Порядок Действия" и "Трактовка Анализа" может производить неправильные результаты.
Не получится достичь обоснованного вывода в отношении результата теста, если будет проходить профилактика с неопределенными или ложными результатами.
Фермент, при проведении лечения эритроцитами может реагировать на данный реагент.
Благодаря изменчивости экспрессии антигена, реакционная способность этого реагента против определенных фенотипов может дать более слабую реактивность по сравнению с контрольными клетками.
Эритроциты, покрытые аллоантителами или аутоантителами такой же или подобной специфичности в качестве реагента (т.е. клетки, которые являются положительными в прямом антиглобулиновом тесте (ПАТ)) не подходят для данной процедуры тестирования.
Описанные процедуры для тестирования подходят для использования с Кумбс-сывороткой, производимой антитоксин GmbH. По принципу Coombs-sera могут быть использованы другие производители, но лаборатории должны следовать процедурам данного производителя. Также лаборатории должны следовать утвержденным процедурам проверки, чтобы продемонстрировать совместимость этого продукта.