Состав**
Ингредиенты
|
М009 грамм/литр
|
Гидролизат казеина
|
15,00
|
Дрожжевой экстракт
|
5,00
|
Мясной экстракт
|
–
|
Глюкоза
|
5,50
|
Натрия хлорид
|
2,50
|
L-цистин
|
0,50
|
Натрия тиогликолят
|
0,50
|
Резазурин
|
0,001
|
Агар-агар
|
0,75
|
Конечное значение рН (при 25°С)
|
7,1 ± 0,2
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 29,75 г порошка М009 или 34,75 г порошка М380 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 25°С и оставить для хранения в темном прохладном месте (при температуре ниже 25°С).
Примечание: если более, чем треть среды сверху стала розового цвета, ее можно один раз восстановить, прогрев в кипящей водяной бане или струе пара до исчезновения розовой окраски.
Принцип и оценка результата:
Эту среду предложил Бревер (1) для быстрого культивирования аэробов, а также анаэробов (ввиду добавления редуцирующего вещества и небольшого количества агар-агара). Американские специалисты (2, 3) рекомендовали указанные среды для тестов на стерильность антибиотиков, биоматериала, пищевых продуктов, а также для определения фенолового коэффициента и спороцидных свойств дезинфектантов. Вместе с тем, среды предназначены для исследования прозрачных жидкостей и водорастворимых материалов.
Глюкоза, гидролизат казеина, дрожжевой экстракт, мясной экстракт и L-цистин дают питательные вещества для размножения бактерий. Тиогликолят натрия снижает окислительно-восстановительный потенциал, а также нейтрализует бактериостатический эффект соединений ртути и других тяжелых металлов, находящихся в исследуемом материале. Любое повышение концентрации кислорода сопровождается изменением цвета специального индикатора редокс-потенциала (резазурина) на красный (4, 5, 6). Низкий редокс-потенциал помогает поддерживать небольшое количество агара в среде (7).
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет светло-соломенную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует; не более 10% в ее верхней части может окрашиваться в розовый цвет при хранении.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор М009 (2,97% вес/об) имеет рН 7,1 ± 0,2, раствор М380 (3,47% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 48-72 ч при 35°С.
Штамм микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
*Bacillus subtilis (6633)
|
Обильный
|
*Candida albicans (10231)
|
Обильный
|
*Clostridium sporogenes (11437)
|
Обильный
|
*Micrococcus luteus (9341)
|
Обильный
|
Neisseria meningitidis (13090)
|
Обильный
|
Streptococcus pyogenes (19615)
|
Обильный
|
*Bacteroides vulgatus (8482)
|
Средний или хороший
|
Примечание: * культуру можно инкубировать при 25-30°С в течение 2-7 дней.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при комнатной температуре в темноте.