Агар Левина
Агар Левина, кат.номер: М022, 500 гр.
Эту среду рекомендуют для выделения, подсчета и дифференциации грамотрицательных микроорганизмов кишечной группы.
EMB Agar, Levine (M022)
Рост Escherichia coli
Состав**:
Ингредиенты |
М022, грамм/литр |
Пептический перевар животной ткани |
10 |
Калия гидрофосфат |
2 |
Лактоза |
10 |
Эозин Y |
0,4 |
Метиленовый синий |
0,065 |
Агар-агар |
15 |
Конечное значение рН (при 25°С) |
7,1 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 37,5 г порошка М022 или 27,5 г порошка М301 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Добавить соответствующий углевод к Основе агара Левина (М301) перед стерилизацией. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. НЕ ДОПУСКАТЬ ПЕРЕГРЕВАНИЯ СРЕДЫ. Остудить до 50°С и встряхнуть для окисления метиленового синего (чтобы восстановить его синий цвет и размешать хлопьевидный преципитат). Если среда используется в тот же день, ее можно не автоклавировать.
Предупреждение: среду надо хранить в темноте, чтобы не допустить ее окисления на свету.
Принцип и оценка результата:
Эта среда разработана Levine (1, 2) и используется для дифференциации Escherichia coli и Enterobacter aerogenes, а также для быстрой идентификации грибов Candida albicans. Американские специалисты рекомендуют эту среду для выделения, подсчета и дифференциации грамотрицательных микроорганизмов кишечной (колиформной) группы (3, 4, 5).
Метиленовый синий и эозин в определенной степени подавляют рост грамположительных микроорганизмов. Данные красители служат в качестве дифференцирующими индикаторами ферментации лактозы. На этой среде могут вырастать в виде точечных колоний дрожжи и некоторые грамположительные бактерии, например, энтерококки. Weld (6, 7) предложил использовать агар Левина с добавлением хлортетрациклина гидрохлорида для быстрой идентификации грибов Candida albicans в клиническом материале. Обнаружение этих грибов в таком материале, как фекалии, оральный и вагинальный секрет, ногти, чешуйки кожи и другом возможно через 24-48 ч инкубирования при 35-37°С в атмосфере, содержащей 10% углекислого газа. Однако культуральные свойства грибов при этом варьируют.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-лиловый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет красновато-лиловую окраску, опалесцирует с зеленоватым оттенком и легким преципитатом, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор М022 (3,75% вес/об) имеет рН 7,1 ± 0,2, водный раствор М301 (2,75% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) |
Рост |
Цвет колоний на среде М317 |
Escherichia coli (25922) |
Обильный |
Черно-синие с металлическим блеском |
Pseudomonas aeruginosa (27853) |
Обильный |
Бесцветные |
Salmonella typhimurium (14028) |
Обильный |
Бесцветные |
*Candida albicans (10231) |
Хороший или обильный |
Бесцветные |
Enterobacter aerogenes (13048) |
Хороший |
Розовые или красные |
Staphylococcus aureus (25923) |
Слабый или отсутствует |
Бесцветные |
Saccharomyces cerevisiae (9763) |
Слабый или отсутствует |
Кремовые |
Enterococcus faecalis (29212) |
Подавляется |
– |
Примечание: "*" в атмосфере с 10% углекислого газа;
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С в темноте.