Основа агара Симмонса / Цитратный агар
Основа агара Симмонса, кат.номер: М411, 500 гр.
Цитратный агар, кат.номер: М 099, 500 гр
Эти среды используют для дифференциации энтеробактерий.
Состав:
Ингредиенты
|
М411 грамм/литр
|
М099 грамм/литр
|
Магния сульфат
|
0,20
|
0,20
|
Аммония дигидрофосфат
|
0,20
|
1,00
|
Натрия аммонийного фосфат
|
0,80
|
–
|
Калия гидрофосфат
|
–
|
1,00
|
Натрия цитрат
|
–
|
2,00
|
Натрия хлорид
|
5,00
|
5,00
|
Бромтимоловый синий
|
0,08
|
0,08
|
Агар-агар
|
15,00
|
15,00
|
Конечное значение рН (при 25°С)
|
7,0 ± 0,2
|
6,8 ± 0,2
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 21,3 г порошка М411 в 900 мл дистиллированной воды или 24,28 г порошка М099 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Добавить 100 мл 0,2%-ного раствора цитрата натрия в среду М411. Тщательно перемешать и разлить в пробирки или флаконы. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин.
Принцип и оценка результата:
Эти среды используют для дифференциации энтеробактерий по способности использовать цитрат в качестве единственного источника углерода. Первоначально цитратная среда была разработана Козером (1), она содержала соль аммония в качестве единственного источника азота и цитрат в качестве единственного источника углерода, что позволяло дифференцировать Escherichia coli и Enterobacter aerogenes. Затем Симмонс (2) модифицировал среду, введя в ее состав агар-агар и бромтимоловый синий (3). Эта среда рекомендована АРНА (4). Среда содержит гидрофосфат аммония в качестве единственного источника азота и цитрат натрия в качестве единственного источника углерода. Бромтимоловый синий – индикатор рН. Микроорганизмы в ходе размножения на среде продуцируют щелочные продукты, которые способствуют изменению цвета индикатора с зеленого на синий.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет травянисто-зеленую окраску, слегка опалесцирует, когда в пробирках формируется скошенный гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор М411 (2,13% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2, а раствор М099 (2,43% вес/об) имеет рН 6,8 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) |
Enterobacter aerogenes (13048) |
Рост |
Хороший или обильный |
Цвет среды |
Синий |
Цитрат (утилизация) |
+ |
Salmonella enteritidis (13076) |
Рост |
Хороший или обильный |
Цвет среды |
Синий |
Цитрат (утилизация) |
+ |
Salmonella typhimurium(14028) |
Рост |
Хороший или обильный |
Цвет среды |
Синий |
Цитрат (утилизация) |
+ |
Salmonella typhi (6539) |
Рост |
Средний или хороший |
Цвет среды |
Зеленый |
Цитрат (утилизация) |
– |
Escherichia coli (25922) |
Рост |
Отсутствует |
Цвет среды |
Зеленый |
Цитрат (утилизация) |
– |
Shigella dysenteriae (13313) |
Рост |
Отсутствует |
Цвет среды |
Зеленый |
Цитрат (утилизация) |
– |
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.