Среда Клиглера
Среда Клиглера, кат.номер М078, 500 гр.
Эту среду в качестве дифференциальной рекомендуют для изучения у грамотрицательных бактерий кишечного происхождения способности ферментировать глюкозу и лактозу, а также продуцировать сероводород.
Состав:
Ингредиенты
|
грамм/ литр
|
Пептический перевар животной ткани
|
15,00
|
Мясной экстракт
|
3,00
|
Дрожжевой экстракт
|
3,00
|
Протеозопептон
|
5,00
|
Лактоза
|
10,00
|
Глюкоза
|
1,00
|
Железа сульфат
|
0,20
|
Натрия хлорид
|
5,00
|
Натрия тиосульфат
|
0,30
|
Феноловый красный
|
0,024
|
Агар-агар
|
15,00
|
Конечное значение рН (при 25°С)
|
7,4 ± 0,2
|
**Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 57,5 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Тщательно перемешать и разлить в пробирки. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить пробирки в таком положении, чтобы получить скошенную часть и столбик высотой 2,5 см.
Наилучшие результаты получают на свежеприготовленной среде.
Не рекомендуется применять пробирки с завинчивающимися крышками и флаконы.
Принцип и оценка результата:
Клиглер разработал среду для дифференциации бактерий тифо-паратифозной группы (1). Затем он провел оценку этой среды в сочетании с двойной средой Ресселя (2, 3). Bailay и Lacey (4) предложили заменить индикатор Андреде на феноловый красный, что позволяет дифференцировать грамотрицательные бактерии по их способности ферментировать глюкозу и лактозу и продуцировать сероводород. На агаре Клиглера можно отличать бактерии, ферментирующие и не ферментирующие лактозу, Salmonella typhi от других сальмонелл, а также Salmonella paratyphi А от Salmonella schottmuelleri и Salmonella enteritidis.
Тиосульфат натрия и сульфат железа усиливают образование сероводорода. Феноловый красный – индикатор рН. О ферментации глюкозы свидетельствует желтый столбик, лактозы – желтый скос, об образовании сероводорода – почернение столбика. На агар Клиглера для предварительной идентификации засевают чистые культуры с чашечных сред, например, Агара МакКонки (М082), Висмут-сульфитного агара (М027) или Дезоксихолат-цитратного агара (М065), Агара Сальмонелла-Шигелла (М108).
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-розовый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет красную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в пробирках формируется столбик и скос геля.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (5,75% вес/об) имеет рН 7,4 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Citrobacter freundii |
Рост |
Обильный |
Скос |
К |
Столбик |
К |
Газ |
+ |
Сероводород |
+ |
Escherichia coli |
Рост |
Обильный |
Скос |
К |
Столбик |
К |
Газ |
+ |
Сероводород |
– |
Enterobacter aerogenes (13048) |
Рост |
Обильный |
Скос |
К |
Столбик |
К |
Газ |
+ |
Сероводород |
– |
Klebsiella pneumoniae |
Рост |
Обильный |
Скос |
К |
Столбик |
К |
Газ |
+ |
Сероводород |
– |
Proteus vulgaris |
Рост |
Обильный |
Скос |
Щ |
Столбик |
К |
Газ |
– |
Сероводород |
+ |
Salmonella enteritidis |
Рост |
Обильный |
Скос |
Щ |
Столбик |
К |
Газ |
+ |
Сероводород |
+ |
Salmonella paratyphi A |
Рост |
Обильный |
Скос |
Щ |
Столбик |
К |
Газ |
+ |
Сероводород |
– |
Salmonella schottmuelleri |
Рост |
Обильный |
Скос |
Щ |
Столбик |
К |
Газ |
+ |
Сероводород |
+ |
Salmonella typhi |
Рост |
Обильный |
Скос |
Щ |
Столбик |
К |
Газ |
– |
Сероводород |
+ |
Shigella flexneri |
Рост |
Обильный |
Скос |
Щ |
Столбик |
К |
Газ |
– |
Сероводород |
– |
Примечание:
- К - образование кислоты (желтый цвет);
- Щ - образование щелочи (красный цвет);
- "+" - положительная реакция (почернение);
- "–" - отрицательная реакция (среда без изменения).
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.